一、儀器校準與準備

1. 校準儀器：
   • 開啟儀器，檢查溫度、壓力、濕度等參數(shù)是否正常。
   • 使用標準菌株或校準工具驗證菌落計數(shù)功能，確保儀器顯示精度符合要求。
2. 試劑與樣品準備：
   • 準備無菌生理鹽水、培養(yǎng)基（如營養(yǎng)瓊脂）、無菌棉拭子等。
   • 樣品需進行無菌處理，若為液體需控制顆粒雜質(zhì)（如離心或過濾）。

二、樣品處理與加載

1. 無菌操作：
   • 在潔凈臺或無菌室內(nèi)操作，避免環(huán)境微生物污染。
   • 固體樣品用無菌棉拭子擦拭表面，液體樣品直接抽濾。
2. 加載樣品：
   • 將樣品注入濾杯，注意液體高度不超過刻度線。
   • 啟動真空泵，使樣品通過濾膜，微生物被截留在膜上。

三、濾膜轉(zhuǎn)移與培養(yǎng)

1. 轉(zhuǎn)移濾膜：
   • 用無菌鑷子取出濾膜，菌面朝上貼于培養(yǎng)基表面，避免氣泡。
   • 封閉培養(yǎng)皿，標記樣品信息。
2. 恒溫培養(yǎng)：
   • 將培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱，根據(jù)微生物類型設(shè)定溫度（如37℃）和時間（24-48小時）。
   • 培養(yǎng)期間每日觀察菌落生長情況。

四、菌落計數(shù)與分析

1. 計數(shù)規(guī)則：
   • 培養(yǎng)結(jié)束后，統(tǒng)計濾膜上的菌落數(shù)，按公式換算為樣品中的微生物含量。
   • 區(qū)分細菌、霉菌、酵母菌，記錄形態(tài)學(xué)特征。
2. 結(jié)果分析：
   • 對比標準限值（如藥典規(guī)定），判斷樣品是否合格。
   • 異常結(jié)果需復(fù)檢或結(jié)合其他方法驗證。

五、清潔與維護

1. 儀器清潔：
   • 使用75%酒精擦拭儀器表面，濾杯、硅膠管用蒸餾水沖洗后晾干。
   • 真空泵定期更換機油，保持管路暢通。
2. 耗材管理：
   • 濾膜、密封圈等耗材需干燥保存，避免污染。
   • 定期校準儀器，記錄維護日志。

總結(jié)：微生物限度儀通過“校準-抽濾-培養(yǎng)-計數(shù)-維護”的閉環(huán)流程，為藥品、食品等領(lǐng)域提供高效的微生物污染檢測方案。標準化操作結(jié)合嚴格質(zhì)控，是保障產(chǎn)品質(zhì)量與安全的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。